Anti-herpes 124

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Citotoxicidad in vitro y anti-virus herpes simplex tipo 1 la actividad del extracto hidroalcohólico, fracciones y compuestos aislados de la corteza del tallo de Schinus terebinthifolius Raddi Samara Requena Nocchi 1. Gislaine Franco de Moura-Costa 1. Claudio Roberto Novello 2. Juliana Rodrigues 1. Renata Longhini 3. Jo, Brasil Fecha de presentación Fecha de la Decisión Fecha de publicación web Dirección de correspondencia: tnía Ueda-Nakamura Departamento de Ciencias básicas de la Salud, Universidad Estatal de Maringá, Av. Colombo 5790, BR-87020-900 Maringa, PR Brasil Fuente de financiación: Ninguna, Conflicto de intereses: Ninguno Antecedentes: El virus del herpes simple tipo 1 (HSV-1) se asocia con infecciones orofaciales y se transmite por contacto directo con secreciones infectadas. Varios esfuerzos se han invertido en la búsqueda de fármacos para el tratamiento para el herpes. Schinus terebinthifolius se utiliza en varias enfermedades y entre ellos, para el tratamiento tópico de las heridas de la piel, especialmente las heridas de las mucosas, ya sea o no infectados. Objetivo: Evaluar la actividad de citotoxicidad y anti-HSV-1 del extracto hidroalcohólico crudo (CHE) a partir de la corteza del tallo de S. terebinthifolius. así como sus fracciones y compuestos aislados. Materiales y Métodos: La CHE fue sometida a fraccionamiento bioguided. La actividad anti-VHS-1 y la citotoxicidad de la CHE, sus fracciones, y compuestos aislados fueron evaluados in vitro por el método SRB. Una investigación preliminar de la acción de CHE en la interacción virushost se llevó a cabo por el mismo ensayo. Resultados: CHE presentan flavan-3-oles y mostraron anti-HSV-1 actividad, mejor que sus fracciones y compuestos aislados. La clase de sustancias que se encuentran en CHE puede unirse a las proteínas para formar complejos inestables y los virus con envoltura, como HSV-1 puede ser vulnerable a esta acción. Nuestros resultados sugieren que la CHE interfirió con las estructuras de envoltura del virión, enmascarando los receptores virales que son necesarios para la adsorción o la entrada en las células huésped. Conclusión: El potencial exhibido investigado planta para el tratamiento futuro desarrollo contra HSV-1, pero más pruebas son necesarias, especialmente para dilucidar el mecanismo de acción de CHE, así como los estudios preclínicos y clínicos para confirmar su seguridad y eficacia. Palabras clave: Actividad antiviral, Aroeira, citotoxicidad, virus del herpes simple, el virus del herpes simple tipo 1, Schinus terebinthifolius Raddi Como citar este artículo: Nocchi SR, de Moura-Costa GF, Novello CR, Rodrigues J, Longhini R, de Mello JC, Filho BP, Nakamura CV, Ueda-Nakamura T. En la citotoxicidad in vitro y anti-virus herpes simplex tipo 1 la actividad del extracto hidroalcohólico, fracciones y compuestos aislados de la corteza del tallo de Schinus terebinthifolius Raddi. Phcog Mag 201 612: 160-4 Forma de citar esta URL: Nocchi SR, de Moura-Costa GF, Novello CR, J Rodrigues, Longhini R, de Mello JC, BP ​​Filho, Nakamura CV, Ueda-Nakamura T. En la citotoxicidad in vitro y anti-virus herpes simplex tipo 1 la actividad del extracto hidroalcohólico, fracciones y compuestos aislados de la corteza del tallo de Schinus terebinthifolius Raddi. Phcog Mag línea serie 2016 citado 2016 podrán 1612: 160-4. Disponible de: http://www. phcog. com/text. asp2016/12/46/160/177903 extracto hidroalcohólico crudo (CHE) presenta una actividad prometedora contra el virus del herpes simple tipo 1 (HSV 1), con índice de selectividad (SI) 22,50 CHE tiene flavan-3-oles en su composición, tales como catequina y galocatequina las fracciones y compuestos aislados obtenidos a partir de CHE por fraccionamiento bioguided son menos activos que la CHE contra HSV-1 CHE interfiere con proceso de entrada viral en la célula huésped y actúa directamente en la partícula viral. Herpes virus simple tipo 1 (HSV-1) es un patógeno humano común asociado con las infecciones orofaciales y encefalitis. 1 Los agentes antivirales con licencia actualmente para el tratamiento de infecciones por el virus del herpes incluyen el aciclovir y sus derivados, foscarnet y cidofovir. 2 Los efectos secundarios tóxicos y la aparición de cepas de virus que son resistentes a estos fármacos, mejoran la necesidad de nuevos compuestos eficaces contra las enfermedades infecciosas virales. 3, 4 Un estudio de cribado anterior evaluaron los efectos de extractos de plantas contra HSV-1, en la que los efectos de Schinus terebinthifolius Raddi eran notables. 5 S. terebinthifolius (Anacardiaceae), conocido popularmente como se distribuye desde el noreste al sur de la costa brasileña. 6 Muchos estudios han confirmado experimentalmente que esta planta tiene antimicrobianos, anti-inflamatorio, y las propiedades anti-ulcerogénicos. 7, 8, 9, 10 El extracto de la corteza del tallo de S. terebinthifolius es ampliamente utilizado por la población del Nordeste de Brasil para el tratamiento tópico de las heridas de la piel, especialmente las heridas de las mucosas, ya sea o no infectados, en los casos de inflamación de la encías y la garganta en forma de haga gárgaras y enjuagues bucales. 11 Hay varios factores que pueden conducir a lesiones en la piel y mucosas, incluyendo las infecciones por Candida albicans y el VHS-1. Debido a las dificultades con diagnósticos y porque a veces es el único tratamiento disponible, algunas personas usan esta planta por cualquier lesión que sostienen, incluso sin conocer su causa. A pesar de los usos tradicionales y diversos estudios biológicos, se han realizado pocos estudios fitoquímicos y antivirales de esta planta. Materiales y Métodos Material vegetal y extraer la preparación corteza del tallo de S. terebinthifolius se recogieron en la Universidad Estatal de Maring, Brasil, de los cuales ejemplar de muestra se habían depositado en el herbario de la Universidad Europea de Madrid (HUEM 22057) que fue previamente identificado por el Prof. Dr. María Auxiliadora Milaneze Gutierre. La corteza se secó a temperatura ambiente y luego se pulverizó con un molino de martillos (Tigre ASN-5). El extracto hidroalcohólico crudo (CHE) se obtuvo mediante el turbo-extracción (Ultra-Turrax, modelo UTC115KT, Wilmington, Carolina del Norte, EE. UU.) de 500 g de polvo con las cortezas 70). El aislamiento y la identificación de compuestos El CHE fue sometida a fraccionamiento bioguided. El CHE (70 g) se resuspendió en agua (700 ml) y se repartió con acetato de etilo (700 ml) para obtener una fracción de agua (WF) y la fracción de acetato de etilo (AF). El AF (4,50 g) se cromatografió en una columna de Sephadex Quattro LC, Manchester, Inglaterra), y los datos se compararon con la literatura. De alto rendimiento perfil de cromatografía de líquidos CHE 10 pureza obtenida de Stryphnodendron adstringens Mart. Coville en el Palafito, UEM) se utilizó para identificar el componente aislado en los extractos crudos. Las células y los virus Vero (riñón de mono verde africano) (ATCC CCL-81) fueron cultivadas y mantenidas en DulbeccoC hasta su uso. células Vero se sembraron en placas de tejido de 96 pocillos a una densidad de 2,5 de las células). Ensayos para la actividad antiviral se sembraron las células Vero en placas de tejido de 96 pocillos a una densidad de 2,5 concentración efectiva (CE 50). Los ensayos se realizaron por triplicado en tres experimentos independientes. Mecanismo de virus herpes simplex tipo 1 supresión inducida por el extracto hidroalcohólico crudo Para investigar los pasos del ciclo de la multiplicación del virus en la que actúa la CHE, se utilizó el ensayo de SRB para determinar la viabilidad celular en todas las condiciones experimentales se describen a continuación. La actividad se determinó como un porcentaje de inhibición de CPE inducido por el virus y se expresó como un porcentaje de la densidad óptica de la muestra de ensayo en comparación con las células infectadas por virus no tratados. El CHE se añadió a las células a solamente ciertos momentos: antes de la infección (por 1 h y 24 h), durante la fase de adsorción, durante las primeras etapas de la infección (fases de adsorción y penetración), y después de la infección. La inactivación directa de HSV-1 por la CHE también fue probado. Para esto, CHE a diferentes concentraciones (0,01, 0,10, 1,00, 10,00 y 100,00 C. A continuación se lavó la monocapa de células con solución salina tamponada con fosfato y además se incubaron en medio de recubrimiento durante 72 h. Los resultados se presentan como los valores medios de tres experimentos independientes. Los valores de CE 50 y CC 50 se obtuvieron mediante la curva de dosis-respuesta y análisis de regresión de CC triplicado 50. y los valores de EC50 se analizaron por ANOVA de una vía seguido de la prueba de Tukey, teniendo en cuenta P 0,05 significativa. La observación del conocimiento popular es la estrategia más común para la selección de especies de plantas que pueden ser potencialmente utilizados para tratar enfermedades. 19 extractos botánicos exhiben un amplio espectro de propiedades biológicas y farmacológicas, incluyendo citoprotección, contra el cáncer, anti-inflamatorio, antimicrobiano, y los efectos de inmunomodulación. 8 , 20, 21, 22 Tales plantas medicinales son una fuente importante para la detección de drogas y antiviral. desarrollo de 5, 23, 24, 25 Varios metabolitos secundarios, incluyendo flavonoides, saponinas y taninos, se han notificado a tener la actividad antiviral. 26, 27 Los estudios con S. terebinthifolius han mostrado la presencia de varios constituyentes, incluyendo terpenos, fenoles 28, 29, 30, 31 taninos flavonoides, 32 antraquinonas, xantonas, y los esteroides libres. 21 Una mezcla de disolventes (agua, etanol y acetona) se optimizó para la extracción de la corteza de S. terebinthifolius. y un método espectrofotométrico UV-VIS fue desarrollado y validado para el análisis de polifenoles totales en el extracto. Los resultados demostraron un contenido total de polifenoles del 29.39l / ml). 24 El presente estudio informó de la citotoxicidad in vitro y anti-HSV-1 actividad de extracto de S. terebinthifolius, fracciones y compuestos puros (galocatequina y catequina) aislado de la corteza del tallo de esta planta se usa con fines medicinales. La catequina y galocatequina pertenecen a la clase de polifenoles, que son un grupo grande y muy heterogénea de productos naturales, con las características generales de múltiples hidroxilación de sistemas aromáticos complejos. Hemos demostrado que la catequina, pero no galocatequina presenta actividad anti-HSV-1. A pesar de las similitudes estructurales entre galocatequina y catequina, la primera presenta un grupo hidroxilo adicional, que podría influir en su actividad biológica. El extracto crudo y una de las fracciones ricas en catequina obtenido a partir de fibra de coco bizcocho tostado de Cocos nucifera L. mostraron actividad inhibidora contra resistente a aciclovir de HSV-1. 25 Estos resultados se corresponden con los hallazgos del presente estudio debido a que la CHE demostró ser rico en catequinas, según lo observado por el perfil de HPLC. extractos metanólicos de secado Combretum micranthum G. Don (Combretaceae) sale de la actividad antiviral presente contra HSV-1 y HSV-2, y los precursores de los compuestos activos han sido identificados como los taninos condensados. 33 Los compuestos aislados (galocatequina y catequina) también pertenecen a una clase de taninos condensados. Mediante el análisis del perfil de UV de los otros picos (datos no mostrados), se puede inferir que estas sustancias pertenecen a la misma clase. Por lo tanto, tenemos un extracto rico en taninos, lo que confirma los hallazgos de la literatura que los extractos ricos en taninos presentes actividad antiviral. 25, 33 de los extractos, fracciones y compuestos aislados analizados en el presente estudio, la CHE mostraron los resultados más prometedores. El uso de extractos de plantas que comprenden mezclas muy complejas de hasta varios cientos de compuestos en la terapia antiviral es una parte de la terapia de múltiples objetivo. Diferentes compuestos pueden actuar contra diferentes dianas moleculares y inhibir la infección viral de manera más eficaz que un único compuesto solo. 34 Los resultados de este estudio sugieren que el efecto antiviral de la CHE no es causado por un único componente. El efecto biológico parece ser dependiente de la interacción entre los diferentes componentes. fraccionamiento Bioactividad guiada es importante aislar una sustancia activa sin embargo, esta estrategia puede excluir compuestos con actividades farmacológicas relevantes debido a que el efecto no puede ser causada por un único compuesto, sino más bien por una combinación de compuestos, como resultado del sinergismo o farmacocinéticos influencias. 19 Un extracto de propóleo exhibió significativamente mayores efectos anti-herpética y mayor S¿Está de componentes individuales aislados. 35 El SI de un Melissa officinalis extracto contra el VHS fue superior al SIS de los componentes individuales. 36 Estos resultados están de acuerdo con los hallazgos del presente estudio. Para determinar el modo de acción antiviral de la CHE, los experimentos de tiempo de adición se realizaron en diferentes etapas en el ciclo de replicación del virus herpes. Se detectó una disminución significativa en la infectividad viral para HSV-1 cuando los virus fueron tratados con el CHE antes de la infección y cuando las células huésped se trataron con la CHE durante las fases de adsorción y penetración. polifenoles derivados de plantas exhiben actividad anti-HSV en muchos casos, sobre todo por influir en las fases tempranas de la infección por virus. 34 Los polifenoles se unen a las proteínas para formar complejos inestables 37 y los virus con envoltura, entre los cuales virus del herpes simple puede ser vulnerable a la acción de los polifenoles ya que esta clase de sustancias de origen natural puede interactuar fácilmente con las glicoproteínas de la envoltura viral. 38 Nuestros resultados sugieren que la CHE interfirió con las estructuras de envoltura del virión, enmascarando los receptores virales que son necesarios para la adsorción o la entrada en las células huésped o interferir con las estructuras celulares que están relacionados con la entrada del virus. Desconocido es si el efecto inhibidor se debe a la unión de algunos constituyentes del extracto de proteínas virales o celulares implicadas en la adsorción de la célula huésped y la penetración o atribuibles a los daños de los viriones, posiblemente sus sobres, perjudicando de este modo su capacidad para infectar células huésped. 39 En resumen, CHE de S. terebinthifolius presentó flavan-3-oles y mostró anti-HSV-1 actividad, mejor que sus fracciones y compuestos aislados. CHE parece influir en el proceso de la entrada del virus. Se requieren más estudios para determinar el mecanismo exacto de acción, y, probablemente, los múltiples objetivos de la CHE. Además, las investigaciones preclínicas y clínicas deben llevarse a cabo para aclarar el potencial clínico de la CHE para uso terapéutico en infecciones por HSV-1. Los autores agradecen a Viviane Fernandes da Silva y Ivnia Schuquel para la asistencia técnica útil en los experimentos biológicos y químicos. El apoyo financiero y el patrocinio Agradecemos al Consejo Nacional de Desarrollo Científico y Tecnológico (CNPq), Coordinación de Perfeccionamiento de Personal de Nivel Superior (CAPES), Autoridad de Financiación de Estudios y Proyectos (FINEP), Fundación Araucaria, Complejo Central de Apoyo a la Investigación ( ComCap) y el Programa de post-grado en Ciencias farmacéuticas de la Universidad Estatal de Maring, PR, Brasil, para el apoyo financiero. Los conflictos de intereses Los autores declaran no tener conflictos de interés.